歡迎訪(fǎng)問(wèn)蘇州匯通色譜分離純化有限公司網(wǎng)站!
        服務(wù)熱線(xiàn)18912623027
        News新聞動(dòng)態(tài)
        首頁(yè) > 新聞動(dòng)態(tài) > 操作半制備液相色譜儀時(shí)需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟

        操作半制備液相色譜儀時(shí)需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟

        更新時(shí)間:2024-02-23瀏覽:711次

          半制備液相色譜儀是一種用于分離和純化復雜混合物的儀器,尤其適用于天然產(chǎn)物、藥物中間體、生物大分子等物質(zhì)的純化。它結合了分析型液相色譜的分析能力和制備色譜的純化能力,是實(shí)驗室研究中不能少的設備之一。
          操作半制備液相色譜儀時(shí)需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟:
          準備工作:
          確保所有需要使用的溶劑都是高效液相色譜(HPLC)級別,并經(jīng)過(guò)過(guò)濾和脫氣處理。
          根據待分離樣品的性質(zhì)選擇合適的固定相(填充柱料)和移動(dòng)相。
          清潔并檢測所有的管路連接,確保沒(méi)有泄漏。
          準備樣品,必要時(shí)進(jìn)行預處理,如溶解、過(guò)濾等。
          系統檢查與啟動(dòng):
          開(kāi)啟電腦和液相色譜儀的電源,運行控制軟件。
          檢查系統壓力是否穩定,通常初始壓力應接近0bar。
          檢查柱溫箱溫度是否達到預設值。
          系統平衡:
          以較低的流速開(kāi)始泵入移動(dòng)相,逐漸增加至工作流速。
          觀(guān)察壓力變化,待壓力穩定后,讓系統在工作流速下平衡一段時(shí)間,直至基線(xiàn)平穩。
          樣品加載:
          使用定量環(huán)或手動(dòng)進(jìn)樣器加載樣品。
          注意進(jìn)樣量不宜過(guò)大,以免超過(guò)柱容量導致分離效果變差。
          分離過(guò)程:
          監控紫外檢測器或其他類(lèi)型檢測器的輸出信號。
          調整流動(dòng)相的組成和梯度,以?xún)?yōu)化分離條件。
          記錄色譜圖,根據峰型和保留時(shí)間判斷分離效果。
          收集洗脫餾分:
          通過(guò)手動(dòng)或自動(dòng)收集器在不同時(shí)間段收集洗脫液。
          對應于特定目標化合物的洗脫峰,應單獨收集以便后續處理。
          后處理:
          收集到的目標餾分可能需要進(jìn)一步的濃縮和干燥。
          使用旋轉蒸發(fā)器或冷凍干燥機去除溶劑。
          清洗與維護:
          實(shí)驗完成后,用適當的溶劑清洗柱子和系統,保護柱子免受污染。
          定期更換流動(dòng)相濾頭,以防堵塞。
          定期對系統進(jìn)行維護,包括泵的保養、檢測器的校準等。
          數據分析:
          利用色譜數據處理軟件進(jìn)行數據分析,計算純度和收率。
          根據結果調整分離條件,優(yōu)化制備過(guò)程。
          安全注意事項:
          在整個(gè)操作過(guò)程中,要注意個(gè)人防護,避免有機溶劑接觸皮膚和吸入。
          使用易燃易揮發(fā)的有機溶劑時(shí),要確保實(shí)驗室有良好的通風(fēng)設施。
          高壓操作時(shí)需特別小心,避免高壓液體傷人。